Biochemistry. 2001 Sep 18;40(37):11114-20.
Measurement
of myo-inositol turnover in phosphatidylinositol: description of a
model and mass spectrometric method for cultured cortical neurons.
tiivistelmä, Abstract
Myoinositolin (mI) soluunotto ja fosfaotidyyli-inositoliksi (PI) muuttumisen tahti määriteltiin hiiren harmaasta aivosolusta. Merkattiin deuteriumilla myoinositolit viljelmässä. Ajasta riippuviset sytosolisen inositolin ja kalvo fosfoinositidin spesifiset aktiivisuudet mitattiin.MS- menetelmällä. PI muuttumismallissa otettiin huomioon soluun tpoahtuvainositolin virtaus ja laimentuma ja sen siirtymä kalvon PI molekyyliin.hyödynnyskioertoinositoli laimensi merkattua esiaineallasta. ja tällesolulimassa tapahtuvalle prosesille saatiin aikataulu. edeltäjäainealtaan spesifinen aktiviteetti perustasossa oli 0.43. Merkitsijäaineen asettuminen kalvon PI molekyyliin oli lineaarinen 4 ja 10 tunnin välillä neuroni- inkuabatiossa. Lun edeltääaineealtaan laimennuksen laajuusoli satu selville inositolin (mI) siirtyminen fosfatidyyli-inositoliksi (PI) havaittiin olevan 315 nmol/ g proteiinia per tunti. . Laskettiin PI.ssä olevan inositolin puoliintumisaika lineaarisen käyrän joka pisteestä ja korjattiin merkitsijäaineen uudelleen merkkautumisen suhteen. PI.ssä olevan inositolin puoliintumisaika oli 6.7 tuntia, mikä tulkittuna on tämän koeputkijärjestelmän turnover- tahtina 10.3 %. Matemaattinen malli ja staniili isotooppimetodi, joka ässä kuvataan, antaisi dynaamisen PI-signaloinnin määrityksen tietyissä taudeissa tai tiettyjen agenssien vaikutuksesta.
Rates
of myo-inositol (Ins) incorporation and turnover in
phosphatidylinositol (PtdIns) were determined in cultured mouse cortical
neurons. Cells were incubated with deuterium-labeled myo-inositol (Ins)
in culture medium free of unlabeled Ins. The time-dependent changes in
the specific activity of cytosolic Ins and membrane PtdIns were measured
by mass spectrometry. PtdIns turnover was modeled incorporating values
for Ins flux, cytosolic dilution, PtdIns concentration, and rate of
incorporation into PtdIns. Recycled Ins diluted the labeled precursor
pool, and a time course was obtained for this cytosolic process. The
specific activity of the precursor pool at the plateau of the
time-course curve was 0.43 +/- 0.04 (mean +/- SD). The incorporation of
the tracer into PtdIns was linear between 4 and 10 h incubation of the
neurons. After factoring in the extent of dilution of the tracer in the
precursor pool, the rate of Ins incorporation into PtdIns was found to
be 315 +/- 51 nmol (g of protein)(-1) x h(-1). The half-life of Ins in
PtdIns was calculated for each point on the linear incorporation curve
and then corrected for the tracer reincorporation. The half-life of Ins
in PtdIns was 6.7 +/- 0.2 h, which translates into a basal turnover rate
of 10.3%/h in this in vitro system. The mathematical model and the
stable isotope method described here should allow assessment of the
dynamics of PtdIns signaling altered in certain diseases or by agents.
1.5. 2016 Kommenttini: tässä kohdassa pitäisI katsoa mikä on E-VITAMIININ OSUUS inositolin signalointijärjestelmään koska tämä on rajapinta kalvoliukositenja vesiliukoisten inositolien kesken ja voi merkitsee joko heijastusta eri on-off- signalointeihin tai ajallista modulointia on- signalointiin. fundamentaalisessa energiaaineenvaihdunnassa.
1.5. 2016 Kommenttini: tässä kohdassa pitäisI katsoa mikä on E-VITAMIININ OSUUS inositolin signalointijärjestelmään koska tämä on rajapinta kalvoliukositenja vesiliukoisten inositolien kesken ja voi merkitsee joko heijastusta eri on-off- signalointeihin tai ajallista modulointia on- signalointiin. fundamentaalisessa energiaaineenvaihdunnassa.
Inga kommentarer:
Skicka en kommentar